藻紅蛋白（R-Phycoerythrin, R-PE）——新型熒光標(biāo)記染料

來源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2018-08-07 09:12:00【大中小】

藻紅蛋白（R-Phycoerythrin, R-PE）是從紅藻中分離純化的一種熒光蛋白，是一種新型熒光標(biāo)記染料。因?yàn)槠渚哂袕?qiáng)烈的熒光，很好的吸光性能和很高的量子產(chǎn)率，在可見光譜區(qū)有很寬的激發(fā)及發(fā)射范圍，所以在免疫熒光、免疫組化、流式細(xì)胞術(shù)等抗體的熒光標(biāo)記和活體成像中有著廣泛的應(yīng)用。西寶生物專業(yè)提供藻紅蛋白，穩(wěn)定性好，靈敏度高，不易淬滅，咨詢熱線400-021-8158！

產(chǎn)品性質(zhì)

分子量: 約 170,000 道爾頓

純度: Amax/A280 > 5.5

頂值吸收峰: 480/565±5 nm

熒光發(fā)射峰: 575±5 nm

結(jié)構(gòu): 分子結(jié)構(gòu)為通過硫醚鍵連接的載體蛋白與開鏈線性延展的四咯化合物。

產(chǎn)品優(yōu)勢

1、在較寬的PH范圍內(nèi)具有較寬的吸收光譜，比較容易選擇合適的激發(fā)波長，從而得到高效熒光發(fā)射，且激發(fā)時(shí)有特異的熒光發(fā)射峰；

2、吸光度和熒光量子產(chǎn)率很高，熒光強(qiáng)而穩(wěn)定，靈敏度高；

3、具有較小的熒光背景，不易淬滅，熒光保存期較長；

4、水溶性佳，易與其他分子交聯(lián)結(jié)合，非特異性吸附少；

5、天然海洋生物提取，無毒副作用，不含放射性，操作使用安全。易與抗體、生物素、親合素、免疫蛋白等物質(zhì)結(jié)合，制成熒光探針。

應(yīng)用領(lǐng)域

1、作為熒光探針標(biāo)記抗體，生物素和鏈霉親和素或其他蛋白，用于免疫熒光、免疫組化、流式細(xì)胞術(shù)及活體成像實(shí)驗(yàn)。

2、有研究表明藻紅蛋白是一種新型的高效、無毒副作用的光敏藥物，可望開發(fā)為有實(shí)用價(jià)值的新型光動(dòng)力藥物(抑制腫瘤）。

3、藻紅蛋白作為一種天然色素并且無毒副作用，可廣泛用于化妝品、食品和保健品中。

藻紅蛋白（R-PE)標(biāo)記抗體的步驟

1、藻紅蛋白的預(yù)處理

藻紅蛋白凍干粉用純化水溶解，濃度調(diào)整到 5-10 毫克/毫升為宜。

2、藻紅蛋白的衍生化

將琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC)溶解于無水二甲基亞砜（DMSO）配制成 10毫克/毫升的母液，每毫克的藻紅蛋白添加11微升的琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC)，鋁箔封好后于室溫旋轉(zhuǎn)反應(yīng)60分鐘，使藻紅蛋白分子上的氨基與琥珀酰胺反應(yīng)生成衍生化的藻紅蛋白。

交換緩沖液預(yù)先平衡凝膠層析柱，將衍生化的藻紅蛋白過柱，收集藻紅蛋白峰。

3、抗體的處理

二硫蘇糖醇（DTT）溶解于蒸餾水中，配制成1摩爾/升的二硫蘇糖醇（DTT）母液，調(diào)整抗體的濃度，使其濃度至少為4毫克/毫升。

每毫升抗體溶液中加入20微升的二硫蘇糖醇（DTT）母液，室溫靜置反應(yīng)40分鐘，將抗體的二硫鍵打開形成巰基。

交換緩沖液預(yù)先平衡凝膠柱，將反應(yīng)液過柱，收集抗體部分。

4、藻紅蛋白和抗體的共價(jià)交聯(lián)

每毫克抗體加入3.2毫克的琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來酰亞胺)環(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC)衍生化的藻紅蛋白，鋁箔封好后于室溫旋轉(zhuǎn)反應(yīng)60分鐘，使藻紅蛋白分子上的馬來酰亞胺基和抗體上的巰基實(shí)現(xiàn)共價(jià)交聯(lián)。

10毫克的N-乙基馬來酰胺（NEM）溶解于1.0毫升的無水二甲基亞砜（DMSO）中制成N-乙基馬來酰胺（NEM）母液（現(xiàn)配現(xiàn)用）。

每毫克抗體中加入3.4微升N-乙基馬來酰胺（NEM）母液，鋁箔封好后于室溫旋轉(zhuǎn)反應(yīng)60分鐘，反應(yīng)后，使抗體上的巰基封閉。

5、交聯(lián)物的存儲(chǔ)

將交聯(lián)物于存儲(chǔ)緩沖液中透析后保存于2-8℃。

產(chǎn)品列表

貨號	產(chǎn)品名稱	包裝規(guī)格	價(jià)格（元）
DCD0488A	藻紅蛋白（R-PE）晶體	5mg 10mg	1171 2286
DCD0488B	藻紅蛋白（R-PE）沉淀	5mg 10mg	929 1714
DCD0488C	藻紅蛋白（R-PE）凍干粉	5mg 10mg	1175 2290